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重組乙肝病毒核心抗原(rHBcAg)、 重組乙肝病毒e抗原(rHBeAg)制備完成
發(fā)表者:北京博奧森生物      發(fā)表時間:2016-2-15
在我國,乙肝病毒感染及帶病毒者約占人群的十分之一,乙肝病毒可形成慢性感染,是肝癌和肝硬化的主要原因。乙肝病毒的外殼由內質網膜及表面抗原覆蓋,它的里面含病毒的核殼體,由病毒的核心抗原及病毒DNA組成。核心抗原由兩個單體組成,每一個單體含183個氨基酸,前149個氨基酸與形成核心抗原的二聯體有關,后34個氨基酸主要為堿性氨基酸,與病毒DNA直接結合。 乙肝病毒核心抗原(rHBcAg)主要存在于病毒顆粒內,在急性感染的早期即消失,抗核心抗原抗體產生于急性病毒感染,也見于帶病毒者,或康復期的病人。IgM抗核心抗體陽性表示急性感染,IgG抗核心抗體陽性表示曾有感染或慢性感染。 rHBcAg的應用:rHBcAg由大腸桿菌表達,含183個氨基酸,分子量為23kDa。 應用:可用于臨床酶聯免疫檢測及蛋白質電泳固相酶聯免疫檢測。 純化方法及純度:利用拄層析技術,12% SDS-PAGE檢測純度大于95%。 保存方法和穩(wěn)定性:存放在負20度,有效期兩年。 核心抗原溶液:含2M尿素,pH 7.40的50mM 磷酸鹽。 乙型肝炎e抗原(rHBeAg)是由HBVDNAC基因區(qū)編碼的一種非顆粒性的分泌型核殼蛋白,臨床上將其作為判斷HBV活動性復制的指標之一。HBeAg是重要的生物原材料,廣泛用于HBV感染者血清學檢測的相關診斷用品的制備,乙肝病毒的外殼由來自人體的內質網膜及表面抗原覆蓋,它的里面含病毒的核殼體,它由病毒的核心抗原及病毒DNA組成。核心抗原基因可產生兩個不同的蛋白,一個是21.5-kDa的蛋白,含183個氨基酸可與病毒DNA結合,稱核心抗原;另一個為核心抗原的前體,該蛋白除了含與核心抗原相同的183個氨基酸外,在其起始處還有一段含29個氨基酸的多肽,核心抗原前體在內質網內修飾后,其N-端只保留了10個氨基酸,而C-端則去掉了34個與病毒DNA結合的堿性氨基酸,最后e抗原以這種形式被分泌出去。 核心抗原主要存在于病毒顆粒內,在急性感染的早期即消失,抗核心抗原抗體產生于急性病毒感染,也見于帶病毒者,或康復期的病人。IgM抗核心抗體陽性表示急性感染,IgG抗核心抗體陽性表示曾有感染或慢性感染。 如果血清e抗原陽性,表明該病毒有傳染他人的危險,檢測e抗原還可指導治療,e抗原的消失表明治療的有效性。如果病人的抗e抗原陽性,則表明病人急性感染階段的結束,病毒的傳染性大大地降低。 rHBeAg的表達及應用:rHBeAg由大腸桿菌表達,在起始密碼子前含有10個氨基酸,后面和含有149個氨基酸的多肽相連接,分子量為18 kDa。 該重組蛋白可用于臨床酶聯免疫檢測及蛋白質電泳固相酶聯免疫檢測。 純化方法及純度:利用拄層析技術,12% SDS-PAGE檢測純度大于95%。 保存方法和穩(wěn)定性:存放在負20度,有效期兩年。 核心抗原溶液:含2M尿素,pH 7.40的50mM 磷酸鹽。
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